Легкий и что не мало важно ЭФФЕКТИВНЫЙ способ культивации грибов (ЛЮБЫХ, в частности ПСИЛОЦИБИНОВЫХ).

часть 2.

Важное правило при культивации, это:

Придерживаться стерильных условий.

Ваше рабочее место, на котором вы будете проводить инокуляцию питательного раствора — должно быть чистым.

Не обязательно возводить все до Абсолюта, по типу кварцевания, вымывать всё` `помещение какой нить хлоркой.... нет.

Второе правило при культивации, это:

Отсутствие сквозняков в месте где вы будите работать. (Если вы намерены работать на открытом пространстве, просто на столе без каких либо средств защиты от турбулентности воздуха).

Ну это сугубо ИМХО, логика этого мнения примерно следующая В наших с Вами реалиях, культивация грибов это стерильная работа в не стерильных помещениях. В таких условиях применяют SAB — Still Air Box — Коробка с неподвижным воздухом. Считается самый эффективный из бюджетных вариантов который можно себе представить. Принцип работы SABa это не подвижный воздух. Парадокс в том, что в SABe, вы можете выполнять стерильную работу при не стерильном боксе. В SABe мы рассчитываем на удаление контаменантов и загрязненных частиц из воздуха под средством гравитации. А сама коробка блокирует движение и турбулентность воздуха снаружи.

По этому, очень важно что бы вы понимали, что в таком SABe концентрация контаменантов и грязных частиц на дне, и по этому, я рекомендую использовать влажное полотенце под SABom, и работать на какой ни-будь подставке. Влажное полотенце помогает предотвращать движение этих грязных частиц и контаменантов.

Не рекомендую использовать такой тип SABa ( с перчатками ) В таком боксе вы создаете некую герметичность, а движением рук в таких перчатках вы создаете давление в боксе которое приведет в движение находящиеся в нем загрязненных частиц/контаминантов.

Я работаю без SABa, случаи контаминации конечно же были, но эти случаи были в чашках Петри, а не в банках зерном.

Я вам описал процесс…. но не претендую на истину. Решение всегда за вами.

Для работы, кроме SABa, который по моему опыту важен, но можно и без него вам еще потребуется ряд вещей.

1.Чашки Петри.

Настоятельно рекомендую использовать чашки Петри, так как с ними невероятно удобно и легко работать, поработав с чашками Петри, вы вряд-ли перескочите на что либо другое. Важное замечание. Чашки Петри желательно/обязательно должны быть одноразовыми по нескольким причинам. Первая — их дешевизна.

Средняя стоимость чашки одноразовой из полистирола составляет 20–30центов.

Вторая — у вас не будет нужды их мыть\стерилизовать после использования.

Вы просто их выбрасываете так как они стоят копейки.

Не рекомендую использовать стеклянные чашки Петри.

Тут с точностью да на оборот, они дорогие, средняя их стоимость 2 с копейками доллара, а поверьте мне на слово, вам потребуется не одна чашка и даже не 10 для комфортной работы без чувства дефицита.

Из-за их дорогивизны вы будете вынуждены делать дополнительную работу мыть и стерилизовать их, а нужен ли вам этот геморой? а если плохо простерилизовали, залили питательной средой, а потом через 2–4 дня выясняется, что какая-то часть из партии заражена…. и это снова мыть, снова стерилизовать, снова готовить питательную среду, снова разливать по чашкам.

Стоимость 10-ти одноразовых чашек Петри — +-2.5 доллара. Стоимость 10-ти стеклянных чашек Петри — +- 25 долларов. и переплачиваете и ебётесь.

2. Медицинские Перчатки (стерильные\не стерильные)

не имеет значение. не стерильные дешевле.

3. Хирургический скальпель, макетный нож, скульптурный набор.

Тут по выбору, с чем удобно работать, что проще купить и т.д.

Главное что бы это выдерживало высокие температуры, так как в случае с хирургическим скальпелем, если его ручка будет пластиковая, а не металлическая, то вероятнее всего лезвие скальпеля расплавит ручку, такая логика и с другими из перечисленных инструментов.

4.Дезинфицирующее средство Рекомендую покупать дезинфицирующее средство с дозатором\распылителем объемом не менее 200 мл. в моем случае это ахд2000.

5.Газовая горелка С ее помощью вы будете прокалять инструмент из пункта 3.

6.Хирургический пластырь 3м, микропор. Невероятно полезная приблуда которая должна быть в каждом доме. В работе я им заклеиваю с торцов по всей окружности инокулированные чашки Петри, а так же заклеиваю в два слоя отверстия в банках с зерном перед стерилизацией и не снимаю до самого конца, некоторые используют для этого ватные тампоны/диски, некоторые используют синтепон, я использую хирургический пластырь 3м, что и вам настоятельно рекомендую.

7.Зерно (в моем случае овес), агар-агар,фруктоза или мед.

В данной ситуации зерно нужно для приготовления питательного раствора. Вам понадобится примерно пол литровая банка зерна на 1,2–1,3 литра воды. Зерно промываем и оставляем на 12 часов в воде. Далее воду сливаем, зерно промываем, пересыпаем в кастрюлю, заливаем 1,2–1,3 литрами воды, до водим до кипения и засекаем 15–20 минут.

Зерно выкидываем, в полученный бульон добавляем:

20г Агар-агар

20г фруктозы или меда

И помешиваем до полного растворения агар-агара.

Далее так называемый бульон разливаем по банкам/бутылкам, в общем стеклянную тару которую будет удобно стерилизовать будь-то в автоклаве, скороварке или просто в кастрюле. У меня объемы не большие, и кастрюля с стерилизацией прекрасно справляется. стерилизуем от момента кипения полтора — два часа. По истечению времени, даем остыть до комнатной температуры не открывая крышек, ну в случае с автоклавом и скороваркой это тупо опасно.

8.Медицинская маска. Благо в эпоху корона вируса этот аксессуар есть в каждом доме.

Вроде ничего не забыл .

Теперь готовим рабочее место, протираем все спиртом, всё к чему будем прикасаться. Расставляем на рабочей зоне все так, что бы всё было в быстрой доступности и что бы в процессе работы делать как моно меньше лишних телодвижений.

Держим в уме правило одного касания. То-бишь, надев маску, перчатки , протерев по локти руки спиртом, желательно работать в одежде с коротким рукавом , что бы в процессе работы с рукавов ничего не трусилось. Протираем спиртом всё с чем будем иметь контакт, чашку Петри (по наруже), тару с питательным раствором. Снова протираем руки по локти или около того. и теперь в темпе вальса, стараться сделать это за как можно короткий промежуток времени. Ставим чашку Петри и емкость с питательным раствором как вам удобно. Крышку емкости с питательным раствором при откручиваем или откручиваем полностью, но важно что бы она закрывала горлышко в момент простоя. И теперь, приоткрывая чашку Петри, желательно крышку чашки держать над чашкой, а не где то в стороне… в этот промежуток между крышкой чашки и чашкой наливаем питательный раствор в чашку на ваше усмотрение, ну что-бы было не много, так как питательный раствор на данный момент жидкий, что бы не переливался, ну и не на донышке. быстро закрываем чашку Петри, накрываем горлышко тары с питательным раствором и отставляем чашку Петри, готовя на ее место следующую.

Алгоритм работы завершен.

Перед разливом питательного раствора в следующую чашку — протираем чашку спиртом, протираем емкость с раствором, протираем руки и повторяем процесс с разливом.

Когда питательный раствор застынет он будет готов к инокуляции спорами или куском живой ткани.

Процесс инокуляции проходит по такой же схеме, только теперь добавляется скальпель, споровый отпечаток или шприц с споровой взвесью и горелка. Если у вас Шприц с взвесью протираем его спиртом и всё с чем вы будете работать, контактировать — протираете спиртом, и держите в уме правило одного касания.

Кладете перед собой две чашки Петри с питательным раствором(уже застывшим).

Споровый отпечаток — открываете, зажигаете газовую горелку, прокаляете скальпель до красна, остужаете в одной из чашек по той же схеме:

(при открыли крышку, но держите крышку над чашкой, а не в стороне)

охлаждаете скальпель в растворе, пока не перестанет шипеть, ну это дело нескольких секунд, скальпель остыл, далее снимаете скальпелем чуток спор с отпечатка открыв другую чашку петри делаете в ней надрез почти на всю длину чашки. одно снятие спор с отпечатка один надрез в чашке. перед каждым снятием спор скальпель необходимо прокаливать , в одной чашке вы его охлаждаете, другую чашку инокулируете.

Со шприцом с поровой взвесью чуток проще, прокаливаете иглу до красна и при этом затяните чуток воздуха в шприц. Дали игле остыть, не обязательно ее остужать в питательном растворе как в случае с скальпелем и точечно на поверхность питательного раствора или в его дескать массу вводите по дэшке споровую взвесь, можете не точечно, а как скальпелем и при это на протяжении всего движения по дэшке вводить споровую взвесь. Если скальпель необходимо было прокалять каждый раз перед тем как инокулировать питательный раствор, то в случае с шприцом вы один раз прокалили и работаете с одной чашкой Петри пока не закончите, перед работой с другой чашкой — желательно снова прокалить.

Клонирование. Для клонирования берем интересующий нас гриб, прокаленным и уже остывшим скальпелем делаем продольный надрез, надрез этот позволит нам поломать гриб вдоль, и с середины вырезать кусок гриба и поместить на питательный раствор в чашку петри.

Изолируем штаммы по такой же технологии, придерживаясь стерильности. Вырезаем самый успешный штамм из чашки и пересаживаем его в стерильную чашку с питательным раствором.

Всё, ты молодец.

В следующей статье , она, я надеюсь будет короче, я расскажу о климате, инокуляции банок с зерном и всех сопутствующих атрибутах при выращивании мицелия.